Efeito natriurético do bufalin em rins de ratos isolados envolve a ativação da via quinase Na + -K + -ATPase-Src
Francisco J Arnaud-Batista; Graciana T Costa; Ilana Mara Barbosa de Oliveira; Paula P C Costa; Claudia F Santos; Manassés C Fonteles; Daniel E Uchôa; Edilberto R Silveira; Bruno A Cardi; Krishnamurti M Carvalho; Luciana S Amaral; Elisa S C Počas; Luis E M Quintas; François Noël; Nilberto R F Nascimento
Resumo: Os bufadienolidos estão estruturalmente relacionados aos cardenolidos clinicamente relevantes (por exemplo, digoxina) e agora são considerados hormônios esteróides endógenos. A ligação da ouabaína à Na (+) – K (+) – ATPase tem sido associada, nas células renais, à ativação da via Src quinase e à internalização de Na (+) – K (+) – ATPase. No entanto, ainda não se sabe se a ativação dessa cascata também ocorre com outros esteróides cardiotônicos e leva a diurese e natriurese no rim intacto isolado. No presente trabalho, perfundimos rins de ratos por 120 min com bufalina (1, 3 ou 10 μM) e medimos seus efeitos vasculares e tubulares. Posteriormente, investigamos o efeito de 10 μM de 3- (4-clorofenil) 1- (1,1-dimetiletil) -1H-pirazolo [3,4-d] pirimidin-4amina (PP2), um inibidor da família Src da quinase e 1,4-diamino-2,3-diciano-1, 4-bis [2-aminofeniltio] butadieno (UO126), um inibidor altamente seletivo de MEK1 e MEK2, nas alterações renais induzidas por bufalina. A bufalina a 3 e 10 μM aumentou profundamente vários parâmetros da função renal de maneira dependente do tempo e / ou da concentração. Em uma concentração que produziu inibição semelhante do rim de rato Na (+) – K (+) – ATPase, a ouabaína teve um efeito diurético e natriurético muito menor. Embora a bufalina tenha inibido totalmente o rim de rato Na (+) – K (+) – ATPase in vitro, seu IC (50) (33 ± 1 μM) foi três vezes maior que a concentração usada ex vivo e todos os seus efeitos renais foram diminuídos pelo PP2 e UO126. Além disso, a expressão de ERK1 / 2 fosforilada (ativada) aumentou após a perfusão de bufalina e esse efeito foi totalmente evitado após o pré-tratamento com PP2.